HRP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) ,*学发光免疫分析仪发光试剂或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是*类重要的发光试剂。其结构如图4 所示。鲁米诺的氧*反应在碱性缓冲液中进行,在过氧*物酶及活性氧[ 过氧*阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) , 羟自由基(OH·) , 过氧*氢(H2O 2)]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。
早期用鲁米诺直接标记*原(或*体) ,*学发光免疫分析仪发光试剂但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧*物酶标记*体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧*物酶和起动发光试剂(NaOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM半自动分析系统就是利用这*体系专门设计的。
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